西罗莫司酯化物（Temsirolimus）脂质体制备工艺研究

【摘要】西罗莫司酯化物(Temsirolimus)是西罗莫司C-42位丙酸酯类衍生物,其抗肿瘤机制与西罗莫司相同,通过与FKBP-12结合并形成复合物,抑制mTOR激酶从而抑制多条细胞信号传导通路,阻断细胞周期从G1期到S期进程,导致癌细胞死亡。研究发现,其对肾癌、乳腺癌、子宫内膜癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤有很好的疗效。但Temsirolimus的水溶性差,目前上市的Temsirolimus注射剂采用Tween80、PEG400和无水乙醇来增加药物的溶解度,在临床应用中存在易过敏、稳定性差等缺点,同时药物的无选择性分布对机体产生较大的毒副作用,在一定程度上限制了其临床应用。本课题旨在开发能够提高药物溶解度,降低药物毒副作用且方便临床应用的新型给药系统。脂质体具有无毒、无免疫原性、可改变药物的体内分布等优势,在抗肿瘤药物载体方面表现出了的良好应用前景。本课题以磷脂和胆固醇为膜材,制备了Temsirolimus脂质体冻干制剂,主要研究方法和结果如下：建立高效液相色谱法测定Temsirolimus的含量,采用透析法将游离药物与载药脂质体分离,测定其包封率,此方法精密度高,重现性良好。采用薄膜分散法制备Temsirolimus脂质体,对成膜温度、超声次数等制备过程中的主要工艺参数进行了考察,确定最佳的制备工艺：成膜温度为42℃、旋转速度为120rpm、水合时间为30min、超声次数为60次。以包封率为评价指标,对磷脂与药物的质量比、磷脂与胆固醇的质量比及磷脂浓度进行了单因素考察。在此基础上,采用响应面分析法BBD模型对处方进行优化,优化的处方为：磷脂与药物的质量比为20：1,磷脂与胆固醇的质量比为14：1,磷脂浓度为3%。按最优处方制得的脂质体包封率平均值为83.0%,与预测值83.3%相比仅有0.35%的相对误差。采用冷冻干燥技术制备Temsirolimus脂质体冻干制剂。对预冻温度、预冻时间、干燥时间等冻干过程中的主要工艺参数进行了考察,确定最优的冻干工艺,即采用速冻的方式进行预冻,预冻温度为-45℃,预冻时间为4h,干燥时间为36h。以冻干制剂的外观、再分散性、粒径变化为指标,筛选不同的冻干保护剂,确定蔗糖与甘露醇等比合用时保护效果最佳。对Temsirolimus脂质体混悬液和冻干制剂进行表征,初步评价了脂质体的质量和稳定性。按最优处方及工艺制得的脂质体形态圆整,粒径分布均匀,冻干后粒径和包封率变化不大,稳定性较好。采用MTT比色法考察了Temsirolimus脂质体对肿瘤细胞活性的影响。
【作者】马海霞；
【导师】邹祥；
【作者基本信息】西南大学，微生物与生化药学，2014，硕士
【关键词】Temsirolimus；脂质体；薄膜分散法；响应面；处方优化；冷冻干燥；

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